实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)是由T淋巴细胞介导的发生于易感动物的自身免疫病,主要特征为中枢神经系统(CNS)血管周围单个核细胞浸润和白质脱髓鞘,其病理变化与多发性硬化(multiple sclerosis,MS)类似。
由于MS样本不易获取,因此EAE动物模型是研究MS病理过程、发病机制的重要工具,在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。
MOG35-55(髓鞘少突胶质细胞糖蛋白)诱导的EAE模型是一种广泛使用的动物模型,用于MS等中枢神经系统自身免疫性疾病与评估相应的药物药效。在这个模型中,实验动物通过注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白来诱导产生EAE,这些蛋白片段模拟了MS中认为的自身抗原。
构建MOG诱导的EAE模型并利用其进行药效评估通常涉及以下步骤:
1、实验动物的选取:选择合适的品系,通常是易感于EAE的近交系,如C57BL/6小鼠。
2、免疫诱导:将MOG与佐剂(如完全弗氏佐剂,CFA)混合后,注射到动物体内。还会添加PTX(Pertussis Toxin)等辅助成分以增强免疫反应。
3、临床评分:在注射抗原后,定期对动物进行临床评分,监测其行为和运动障碍。评分系统通常包括对瘫痪严重程度的评估。
4、组织学评估:在实验结束时,通过组织学方法(如HE染色、LFB染色)检查动物中枢神经系统的炎症和脱髓鞘情况。
5、分子生物学分析:利用RT-qPCR等技术检测相关细胞因子的表达水平,了解免疫反应的分子机制。
6、数据统计分析:对实验数据进行统计分析,以确定MOG诱导的EAE模型的可靠性和有效性。
7、治疗干预实验:在模型建立后,可进行各种治疗策略的测试,如免疫调节药物、抗炎治疗等,以评估治疗效果。
南模生物现推出EAE小鼠造模服务,部分实验结果如下:
按照标准方案使用MOG诱导,小鼠在致敏后7-14天发病,表现出明显的EAE症状,阳性药芬戈莫德在该模型中表现出良好的治疗效果。
Fig2. MOG诱导EAE模型的体重变化及临床评分
Fig3. MOG诱导EAE模型典型病理染色结果及组织学评分
Fig4. MOG诱导EAE模型中脱髓鞘的病理染色结果及LFB评分
Fig5. MOG诱导EAE模型脊髓中mIL17和mIL1β的表达情况