采血，是除了给药以外的另一个必备动物实验技能。根据采血的部位不同，大小鼠采血大致可以分为以下几种方式：尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血、心脏采血等。本期，小编就给大家系统性的盘点下大小鼠采血的相关知识。首先，我们来看看在动手采血之前需要了解的tips?

　　单次采血量，采血间隔

　　小鼠的循环血量大约是72ml/kg。以25g的成年小鼠为例，它的循环血量大约为1.8ml。大鼠的循环血量大约是64ml/kg。以250g的成年大鼠为例，它的循环血量大约为16ml。

　　表1. 大小鼠的循环血量

　　采集10%的循环血量之后，大约需要2周时间恢复。

　　状况良好的小鼠一般采血量建议不超过循环血量的10%。有研究表明失血超过15%以上实验动物会发生血量减少性休克。以25g的成年小鼠为例，10%的循环血量大约是0.2ml。

　　表2. 大小鼠建议最大采血量

　　采血之后，小鼠需要一段时间的恢复，其血液指标才会恢复到正常水平。下面的表格列出了不同采血量对应的恢复期：

　　表3. 大小鼠采血量及恢复期

　　如果需要多点采血，每周最大采血量最好不超过循环血量的7.5%;每两周最大采血量不超过循环血量的10%。

　　尾尖采血

　　· 麻醉小鼠后，用温水擦拭尾巴，引起轻微的血管扩张。但水温不要过高。

　　· 用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖0.5-1cm。如果需要多次采血，之后每次仅需截除2-3mm。

　　· 可以从尾部向尾尖方向按摩，以增加血流。但是，这会降低血样的质量，增加溶血的风险。

　　· 可以用毛细采血管收集血液，或直接滴入收集管中。

　　· 采血结束后，按压伤口或使用止血剂(如硝酸银)来止血。

　　· 每次采血量大约可达0.1ml。

　　应用：适用于所需血量少的连续多次采血，如血糖或血常规的动态检测。

　　眼眶静脉丛采血

　　· 小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，使眼球突出，眼眶后静脉丛充血。也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。

　　· 抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。

　　· 将毛细采血管置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度刺入。

　　· 在轻轻旋转采血管的同时施加压力。血液将通过毛细作用流入采血管。

　　· 不能刺地过深，一般2-3mm即可。

　　· 采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。

　　· 可用干棉球压住眼眶，确保止血。

　　· 一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。

　　应用：适用于需中等量的血液、避免小鼠死亡的血液指标的连续监测。

　　颌下静脉采血

　　· 保定小鼠，可将小鼠侧卧，使小鼠头部尽量固定。

　　· 在小鼠嘴角沿线与外眼角线橡胶处找到颌下静脉的大致位置，会发现一个无毛的小点，有点像酒窝。基本位于嘴角远端稍低于下巴线。

　　· 针保持垂直于皮肤表面，刺入皮肤。深度不超过针头的斜面。

　　· 拔出针头后，血液就会流出。为方便采血，可使小鼠头部低于心脏高度。

　　· 可以直接使血液滴入采集管，也可以使用毛细采血管。

　　· 采血结束后，按压以止血。

　　· 一般采血量为0.2-0.5ml。

　　应用：小量反复采血，无需麻醉，适用于所需血量少的连续多次采血。

　　隐静脉采血

　　· 将小鼠置于固定管或架中，但保持后腿可自由活动，剃除跗部的毛。

　　· 为使膝盖与踝关节之间的隐静脉更加明显，可以在后腿膝盖以上使用止血带。在近尾侧的皮肤表面可以找到隐静脉。

　　· 针垂直于皮肤表面扎破血管。不要进针过深，以免刺穿肌肉或碰到骨头。

　　· 血液会从入针处慢慢流出，用毛细采血管收集，并松开止血带。

　　· 采血结束后，按压伤口或使用止血剂(如硝酸银)以止血，并将小鼠放回笼内。

　　应用：小量反复采血，无需麻醉，适用于所需血量少的连续多次采血。

　　心脏采血

　　一般有3种心脏采血的姿势：

　　1、托起小鼠躯干使身体垂直与地面。身体直立以防止心脏的偏转或胸部的扭曲。使用1毫升注射器和22g针头。将针头从胸部中央向下5mm处插入，深度5-10mm，将注射器与胸部保持25-30度。

　　2、使小鼠仰卧，通过胸骨垂直插入针头。

　　3、使小鼠侧卧，垂直于胸壁插入针头。

　　· 如果血液没有立刻进入注射器，可以轻轻抽空针管，产生一个真空区。

　　· 当注射器中出现血液时，将针管保持静止并轻轻地抽拉活塞芯杆，以获得更多地血液。

　　· 一般可以采到0.8-1.0ml血液。

　　应用：适用于需血量大的实验终末期的动物采血，常用于血常规、免疫、生化指标的检测。

　　这些采血方式应该怎么选择呢?

　　我们再来总结一下它们各自有什么特点。

　　表4.不同采血方式的特点概况

　　看完了方法，别忘了要练习哦!

　　参考文献

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