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动物实验你必须知道的9种方法!

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在医学教学、科研和医学工作中,无论是在基础医学、临床医学、预防医学等领域,都需要进行各种动物实验。通过对动物的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物实验已经成为医学科学研究和教学工作中不可或缺的重要手段。

动物实验方法多种多样,但其中一些基本方法是通用的,包括动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等。不论从事何种医学研究课题,都需要掌握这些基本方法,因此,动物实验基本方法已成为医学科技工作者必备的基本技能。

下面分享一些动物实验的常用方法:

01、复制动物模型

此法是动物实验最基本的方法,是采用人工的方法使动物在一定致病因素(机械、化学、生物和物理)作用下,造成动物的组织,器官或全身的一定损伤,复制成与人类疾病相似的动物疾病模型,来研究各种疾病的发生、发展规律及防治方法。

02、切开、分离法

此法是以活体动物为对象的整体实验常用方法。习惯上把在麻醉情况下,制备一些实验条件(如:活体解剖、分离暴露器官、组织或进行一些手术制备等措施)进行的研究称为“急性动物实验”。其优点是比较简便,实验条件相对较易控制、对研究的器官也方便直接观察。

但存在着麻醉、手术及存活时间较短等不良因素,也会对实验结果带来一定的影响。因此采用此法应注意麻醉深度要适中,手术要轻巧、少出血、减少创伤,并要熟悉手术部位的神经、血管等。

03、切除和注入提取液法

常用于研究内分泌器官的生理和病理病变,如:切除某一腺体后看辐射对机体的影响、切除某一腺体后看动物出现的症状而推论该腺体的功能,比如蝌蚪是无甲状腺素的,如果注入甲状腺素,蝌蚪很快变成了蛙。

04、离体组织器官法

离体实验是将动物的离体组织器官或生物性致病因子(微生物、寄生虫等),置于一定的存活条件下(如:温度、营养成分、氧气、水、pH等)进行观察的一种实验方法。如:利用离体肠管观察药物对肠管蠕动、吸收、通透性、血流情况等的影响,并进行作用机理的分析;利用大肠杆菌或其它细菌进行药物敏感性实验,从而寻找抑制细菌生长的药物,并研究其作用规律,以便为肠道感染的防治提供线索。

离体实验的优点是方法比较简单,一般不需要很复杂的仪器设备、实验条件也比较容易控制,牵涉的人力较少,所以常被列为分析性研究的一种手段。不足之处是模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入,其结果也往往与体内的变化有一定差距,因此可以作为整体研究的补充和参考。

05、瘘管法

用无菌手术方法给动物造成不同的人造瘘管如:胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液腺瘘管、食道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管可以收集内脏液体,是生理学消化研究的主要方法。此种方法是慢性动物实验常用的方法。

慢性动物实验一般先在无菌操作下制备好实验模型(瘘管法是其中一种),待动物恢复健康后进行研究。这类研究方法的优点在于研究对象的机体内外环境已处于较自然且相对平衡状态,条件比较稳定,所得的结果接近生理情况。但需要事先制备、术后护理、等动物恢复健康后才能从事实验,花费时间较长,工作量较大,因而在选用上受到一定限制。

06、移植法

一般指将动物的器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。如骨髓移植时,将小鼠A(供体)的骨髓注入到小鼠B的血液中(受体),很快可见脾结节化(脾造血),而脾结节的数量反应了造血干细胞的多少,由此可以观察干细胞的变化。

各小鼠之间的骨髓移植叫同种骨髓移植,同一品系小鼠内各小鼠之间的骨髓移植叫同系骨髓,小鼠骨髓移植给大鼠则叫异种骨髓移植。此方法也是在实验研究中常用的。

07、生物电、活性观察法

生物电观察法指对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观察记录,如:心电、肌电、脑电等;活性观察法指对动物组织中各种活动物质用生物化学法测定,如:各种酶、激素等。

08、病理解剖学、组织学观察法

指采用肉眼观察、光镜和电镜检查,来观察和分析动物各种疾病时病理组织的改变。可从组织学的角度来探讨疾病防治机理,例如:通过阑尾组织切片和肉眼观察,分析口服中药、针刺或局部敷药对有炎症阑尾的影响,阐明不同症状时阑尾变化的病理学特点以及某些病人用中西医结合非手术治疗后复发的原因。

近年来,由于电子显微技术的进展,不仅可以观察到病变时细胞内细胞器等亚细胞结构的变化,也可以运用电子扫描方法对动物器官的微小结构进行完整的表层观察。

09、免疫学观察法

一般指注入抗原使动物致敏,制备各种抗血清,如选用新西兰或大白耳家兔制备病原体免疫血清、间接免疫血清、抗补体抗体血清、抗组织免疫血清等,可以采用免疫荧光技术、酶标记免疫技术、放射免疫测定技术、免疫电镜技术等对动物免疫后各种免疫变化进行观察。

当然,除此之外,还有其它方法如:联体动物法,条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学等等。

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