编者：资源增量是实验动物科技发展的核心任务，是实验动物对生命科学研究提供支撑和服务的基础和保障。自上世纪80年代以来，我国老一辈实验动物科学家苦心孤诣，在实验动物资源研发工作中取得的多项开创新成果。

1988年《实验动物管理条例》发布实施，在实验动物工作规范化、法制化管理，保障实验动物和动物实验的质量，推动我国科技发展和民生保障等方面发挥了重要作用。特别是在实验动物资源标准化、新品种/品系开发和动物模型创制方面，取得了令人瞩目的成果。

为此，借“科技资讯”之窗，陆续推出我国实验动物专家在此领域所作的工作及取得的应用成果。

SPF金黄地鼠种群建立及标准化研究

夏放

中国生物技术集团成都生物制品研究所有限责任公司

金黄地鼠(Golden hamster; Mesocricetus auratus)又称叙利亚地鼠，金黄色，成年体重120-150克，染色体22对。目前世界各国饲养的不同品系的金黄地鼠,都是1 9 3 0年在叙利亚发现的同胞后代，由于同一祖先, 遗传学上血缘相近。2003年成都生物制品研究所实验动物中心首先在国内建立了SPF金黄地鼠种群，主要用于乙型脑炎减毒活疫苗制品生产，本文就SPF金黄地鼠种群建立及标准化做简要介绍。

一、金黄地鼠生物学特性

1、一般特性

金黄地鼠毛色通常呈金黄色，成年体重雌性90g-150g，雄性80g-130g，尾长1.53cm，昼伏夜行动物，夜间8-11时行动最为活跃，白天基本都在睡眠，睡眠时全身肌肉松弛，室温低于10度时出现冬眠；牙齿坚硬，雌雄都好斗，容易互相撕咬。金黄地鼠为杂食性动物，有很强的储存食物的习性，口腔两侧各有1个颊囊，可将食物储存于加囊内。

2、生理学特性及应用

金黄地鼠性成熟早,雌性60日龄，雄性75日龄即可配种繁殖，妊娠期15-17天,年产4-6胎,每胎产仔8-10只，哺乳期20-25天，出生体重2-3克，离乳体重25-28克，平均寿命2-3年。

金黄地鼠由于具有特殊的颊囊，常用于肿瘤学研究、血管生理学和微循环研究，适用于肿瘤移植、筛选、诱发和治疗性研究、血管生理学和微循环研究的动物模型。此外金黄地鼠由于性成熟早，怀孕期短，动情周期准确，因而适用于生殖生理学研究。

二、金黄地鼠标准化研究

1、SPF金黄地鼠种群建立

2003年成都公司采用无菌剖腹产技术建立了SPF金黄地鼠种群，2004年规模化生产后开始用于乙型脑炎减毒活疫苗生产，2010年对该种群再次采用无菌剖腹产技术，并严格按照遗传矩阵繁育模式，建立起720只SPF金黄地鼠组成的标准化核心种群。

2、SPF金黄地鼠的生物学特性研究

本公司分别在2006和2008年对SPF金黄地鼠进行了生长发育指标、各发育阶段各脏器指标，繁殖生理指标以及主要生理生化指标进行了系统性研究。研究获得的基础数据填补了国内SPF金黄地鼠研究空白，为拓宽SPF金黄地鼠的应用范围奠定了基础。

3、SPF金黄地鼠排除了多种微生物和寄生虫

从2003年开始，本公司每年进行6次SPF金黄地鼠种群的微生物和寄生虫检测，其中一次送澳大利亚Cerberus专业实验室检测，检测的病毒达到18种，细菌16种和5种寄生虫，检测结果均为阴性，同时我们还专门送英国BioReliance实验室检测地鼠逆转录病毒和地鼠多瘤病毒，排除了这2种病毒，从而为疫苗生产提供了十分安全的动物原材料。

4、定期对SPF金黄地鼠种群进行遗传检测

从2008年开始，本公司定期对SPF金黄地鼠种群进行遗传检测，通过采用微卫星DNA标记技术和DNA测序技术，证明了SPF金黄地鼠种群的遗传稳定性良好。同时由于建立了采用科学的繁育体系，十五年来SPF金黄地鼠繁殖性能一直保持稳定，平均产仔数保持在10只，成活率达到90%以上。

5、建立符合国际标准的SPF动物厂房设施

2003年本公司参照国外标准，建立了一栋1840平方米的SPF动物生产厂房，每个饲养单元都设立前室和后室，采用独立的空调机组，10几年来该厂房运行良好。

2009年为了通过WHO乙脑疫苗预认证，本公司公司新建了一栋3600平方米的厂房，专门用于SPF金黄地鼠保种和生产；该车间完全采用国际标准建设，整个厂房分为隔离器保种车间和规模化生产车间，前者拥有28台双层不锈钢隔离器，独立的空调机组，进入隔离器空气经过4次过滤处理，并配备UPS电源；生产车间共有6个独立的饲养单元和空调机组，整个建筑对外窗户完全密闭，饲养单元所有的门完全互锁单向开启，并有一套24小时监控系统和报警系统，任何温、湿度和压差异常都会及时报警，这种设计完全避免了交叉污染，从而从硬件为动物种群安全提供了保障。 2012年WHO专家现场检查对该车间的设计和工艺布局给予充分肯定和认可。

6、完善的科学管理制度和SOP

本公司在2010年建立一套完善的QMS体系，该体系包括40多个管理文件，200多个SOP和记录，这其中包括实验动物质量控制程序、实验动物福利方针、实验动物风险管理程序、实验动物中心HACCP以及应急处置预案等管理文件，动物繁殖育种、日常饲养管理和饲养间清场消毒以及高压锅操作等SOP；所有文件和SOP必须经QA审核签发和定期修订，记录有严格的流水号。这样可以保证日常的工作质量，一旦发生问题，具有可追溯性。对饲养人员进行严格培训，熟悉和掌握实验动物基础知识和相关SOP，并考试合格后才能上岗；

7、健全的动物质量控制体系

本公司制订有“实验动物检验与签发程序”，“实验动物质量控制程序”和“核心群SPF金黄地鼠健康监测程序”等质量控制文件；公司QA负责SPF金黄地鼠种群抽样和动物合格签发放行，公司QC每季度按国家标准对核心群和生产群金黄地鼠种群抽样检测；每季度对地鼠饲料检测营养成份，每批灭菌饲料做无菌检验，饲料实行QA签发放行制度；每月对灭菌饮用水和垫料做无菌检验，每月监测饲养间微生物状态，通过这一系列监控措施，确保SPF金黄地鼠种群处于受控状态。

8、验证与3C管理

本公司QA部门每年对动物厂房的空调机组，隔离器和高压灭菌器等关键设备进行验证，并对各种仪表定期校验；一旦发生环境参数异常，设备异常和动物种群异常必须按规定申报NC（不符合性），厂房设施和关键设备更改或更换按规定申报CC（变更控制），对于申报的NC应有相应的预防纠正措施（CAPA），防止类似问题再次出现或发生；物品高压灭菌必须按验证后的模式装载，记录附上相应高压设备打印凭条。

三、SPF金黄地鼠在科研和疫苗生产应用的重要意义

本公司从1978年开始使用金黄地鼠制造狂犬疫苗，2000年开始使用金黄地鼠制造乙型脑炎减毒活疫苗，2003年本公司建立了SPF金黄地鼠核心种群，2004年开始建立规模化生产种群，从2005年开始，每年用于制造乙型脑炎减毒活疫苗的SPF金黄地鼠达到14万只以上，生产量达到20万只，十五年来已经累计供应乙型脑炎减毒活疫苗生产近200万只，2013年本公司的乙脑减毒活疫苗制品成功通过WHO预认证，作为关键原材料的SPF金黄地鼠质量及质控体系也得到了WHO检查官员的高度认可。近年来本公司的乙型脑炎减毒活疫苗年产量在6000万人份，包括出口2000多万人份，累计创造产值20多亿，出口创汇近2亿美元。此外SPF金黄地鼠还大量用于新疫苗的研发和省内外进行生殖生理学研究和其他动物模型。目前本公司正在进行无菌金黄地鼠研发，这将进一步拓宽SPF金黄地鼠的应用范围，为开发人类疾病动物模型服务。

参考文献

[1] 夏放，张华琼，等。SPF金黄仓鼠种群的建立及规模化生产。中国比较医学杂志，Sep.2005,25(3)

[2] 夏放，姚亚夫，等。SPF金黄仓鼠原代肾细胞的安全性。中国生物制品学杂志，April 2007,20（4）

[3] 王洪，张华琼，等。雌雄金黄地鼠血液生理生化指标比较分析。中国比较医学杂志，2008，18（2）

[4] 商海涛，夏放，魏泓，等。金黄地鼠封闭群SPF化后的微卫星遗传学检测。中国实验动物学报，2007，15（6）

[5]夏放，张水田，等。SPF金黄地鼠生物学特性研究。第八届中国西部实验动物年会论文集，2009年。

项目2014年国家项目：乙型脑炎减毒活疫苗国际预认证，项目编号：ZX09304316-001（2014-2016年）