目的 建立干扰素诱导跨膜蛋白 3 基因(Ifitm3)敲除小鼠模型,探究 Ifitm3 对小鼠神经干细胞增殖 和分化的影响。
方法 利用 CRISPR/ Cas9 技术,建立 Ifitm3 敲除小鼠模型,通过基因型鉴定和 Western Blot 检测 IFITM3 的敲除效果;利用苏木素⁃伊红(HE)染色和流式细胞术等方法分析 Ifitm3 敲除小鼠和野生型小鼠的表型差 异。 分离并培养野生型和 Ifitm3 敲除小鼠成体神经干细胞,统计神经球数量和大小,qRT⁃PCR、Western Blot、免疫荧 光技术检测神经干细胞增殖和分化的能力。
结果 成功建立 Ifitm3 敲除小鼠模型,Ifitm3 敲除小鼠发育正常,组织 病理学及免疫系统未见明显异常。 体外实验显示 Ifitm3 敲除抑制小鼠神经干细胞的自我更新潜能,导致神经干细 胞增殖能力下降,并且抑制神经干细胞向未成熟神经元和星形胶质细胞分化。
结论 IFITM3 缺失导致神经干细胞 增殖和分化能力下降,IFITM3 可能参与了神经干细胞的功能调节。
阅读原文:Ifitm3敲除抑制小鼠神经干细胞增殖和分化.pdf
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