目的 建立双光子显微镜下可视化胶质瘤、壁细胞和血管的活体自发荧光的基因小鼠模型并进行 评价。

方法 以 ＰＤＧＦＲβ⁃Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６⁃ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ －基因工程小鼠为观察壁细胞和血管结构的载体，接种 ＧＬ２６１⁃ ＣＦＰ 小鼠胶质瘤细胞并对颅骨进行透明化，通过双光子显微镜动态跟踪观察胶质瘤增殖侵袭过程中血管与壁细胞 的动态变化。

结果 通过基因鉴定证实 ＰＤＧＦＲβ⁃Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６⁃ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ － 基因工程小鼠成功繁育。 对比 Ｃ５７ＢＬ／ ６ 小鼠，基因工程小鼠的形态外观和繁殖等无显著性差异，组织苏木素⁃伊红（ＨＥ）染色切片分析显示脏器 发育无异常。 Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ 诱导下基因工程小鼠的 Ｃｒｅ 重组酶活性至第 ７ 天作用完全。 接种 ＧＬ２６１⁃ＣＦＰ 后观察到胶 质瘤增殖侵袭的动态过程及肿瘤内血管形态结构紊乱、游离壁细胞增多。

结论 成功构建了荧光可视化壁细胞的 基因工程小鼠，分别利用异硫氰酸荧光素⁃葡聚糖标记血管和青色荧光标记肿瘤细胞，使用玻璃圆片与固定环替代 小鼠颅骨，实现了活体状态下长期稳定地动态跟踪小鼠接种脑肿瘤后血管及血管支持细胞的形态结构变化，为研 究脑胶质瘤提供了病理可视化的动物模型。

阅读原文：双光子显微镜技术下胶质瘤⁃壁细胞在体多荧光示踪小鼠模型的建立及应用.pdf