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PAS染色检测方法

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PAS染色:

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂(碱性品红与亚硫酸氢钠)和醛基反应使呈现紫红色。

实验仪器和材料

无水乙醇

二甲苯

高碘酸

偏重亚硫酸钠

碱性品红

苏木素

中性树胶

实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2、高碘酸溶液处理:切片入高碘酸溶液10min,流水冲洗5min。

3、Schiff试剂处理:切片入Schiff试剂10min,流水冲洗5min。

4、苏木素染色:切片入苏木素染液1min,流水冲洗5min。

5、快速脱水:将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。

染色结果:糖原呈红色,细胞核蓝紫色。

注意事项

染色后标本应及早观察和记录,染色后标本保存8天后,将逐渐褪色,保存时间延长,褪色更为明显。

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