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实验动物的肿瘤体积怎样测量才是正确的,看看你测量对了吗?

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说到肿瘤药物研发,大家首先联想到是开始在“小白鼠”身上进行的试验,然后再用到人身上。那么,在小白鼠体内诱导生成的肿瘤,和人类的肿瘤是一模一样的吗?

那么带着这个问题,接下来让我们一起来看看实验动物肿瘤体积的精确测量方法。首先,选择合适的实验动物接种肿瘤细胞。

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一、选哪种实验动物接种肿瘤细胞?

在肿瘤学实验中,常用的瘤株主要分为两大类:鼠源瘤株与人源瘤株。鼠源瘤株可以生长在小鼠体内,可直接在小鼠上进行实验研究。而人源瘤株不能在正常小鼠体内生长,需借助免疫缺陷小鼠(如裸鼠)作为实验对象,以模拟人体环境。


然而,肿瘤的生长形态多样,包括球形、椭圆形、长条形甚至不规则形状,给测量肿瘤体积增加了难度。所以,在活体动物中描述肿瘤大小往往为估算值。

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二、具体的计算公式

对于离体移植瘤,最接近真实数据,具体测量方法是通过体外3D打印技术重现瘤体形态后,再采用排水法进行测量,但这种方法的成本高且周期长,不适合频繁测量肿瘤体积。

目前,针对动物模型上的肿瘤体积测量,位于动物体表的实体瘤大小直接使用游标卡尺进行测量。而对于位于体内的实体瘤,可通过动物活体荧光显像、micro-CT(微型计算机断层扫描)和MRI(磁共振成像)等方法进行测量。也可通过安乐死动物后进行解剖尸检,直接测量肿瘤尺寸,这种方法虽然具有破坏性,但能提供最为直接和准确的体积数据。


卡尺测量法

上文提到,排水法测量得出的数据最接近真实体积。这一观点在加利福尼亚大学洛杉矶分校医学院的Mary M. Tomayko与C. Patrick Reynolds于1989年发表的论文中有提到。他们采用椭球体模型(公式为V=π/6×L[长径]×W[短径]×H[高])计算所得的肿瘤体积,与通过排水法测量的体积最为接近,相关系数达到了r=0.93,充分证明了该计算方法在体积估算中的准确性和可靠性。

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在采用此方法测量前,首要要判断肿瘤的长径与短径,确保测量时长短径处于垂直方向。皮下肿瘤的测量,具体操作如下:使用游标卡尺长度(L,尺寸最长的维度),宽度(W,尺寸较短的维度,垂直于长度所在平面,需确保测量时卡尺与动物身体平面保持平行,高度(H,肿瘤上边界至动物身体表面之间的垂直距离)。通过上述三个维度的测量,可以为后续肿瘤体积的计算提供可靠数据。


在测量的过程中,肿瘤块的长度L和宽度W可以很好地测量出来,但是肿瘤的高度由于另一侧从皮肤长出,不太好测量。 


在实际应用中,因为π=3.14,π/6=0.52,所以我们在不少研究中看到肿瘤计算公式为V=0.52×L×W2,也有实验室用较为简化的公式:V=(W2×L)/2。

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03、注意事项

减少操作员差异:不同人使用同一游标卡尺进行测量时,可能会有2mm的误差,建议在整个测量过程中由同一位操作员完成,以减少误差。

统一测量基准:同一位测量者,如果每次选取的肿瘤长度和宽度的不一致,也会有误差。建议在每次测量时都选择相同位置测量,确保测量的一致性和准确性。

原位与转移肿瘤模型的特殊性:上述提到的肿瘤体积计算公式主要适用于体表或易于直接测量的肿瘤。对于体内原位或转移肿瘤模型,由于直接测量困难,通常采取分期分批安乐死动物的方式,取出瘤体后进行测量。以至于每次实验需要消耗大量的动物以便在不同的时间点进行比较。


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