中医界运用现代科学方法进行相关研究已有多年历史，在病证动物模型上颇有收获。对脾虚证动物模型发展历程进行回顾，对动物选择、造模方法、评价指标、消化系统病证结合模型进行总结和评论。模型动物多选用以大鼠为代表的小型啮齿类。目前，多基于病因病机造模，而较少使用化学药物与物理因素造模，复合因素造模法最常见。评价指标则分为中医证型指标、与“脾”功能和特性有关量化指标，以及方剂反证。功能性腹泻/消化不良为代表的脾虚证病证结合模型是目前研究的重心。脾虚证动物模型研究成绩斐然的同时仍存在许多不足，如缺乏脾虚证模型行业标准和共识，评价指标缺乏系统性和整体性，脾虚理论的现代阐释缺乏统一，学界亟需解决上述问题以促进发展。

病因病机造模

脾虚证多因饥饱失常或过食肥甘厚味生冷，或劳倦过度，或思虑过度、情志失调，或吐泻日久、损伤脾土，或湿邪侵袭、内困脾土，或禀赋不足、素体脾胃虚弱，或久病调养失慎，或他脏病变及脾，或过服苦寒及攻伐药物等致脾胃气血阳阴受到损伤所致。

根据中医理论造模更符合临床情况，具有中医特色，因此应用最为广泛。造模方法如下：

(1) 苦寒泻下法：根据苦寒泻下之剂易伤脾胃的病机，采用番泻叶煎剂、生大黄煎剂、小承气汤煎剂等苦寒泻下剂灌饲实验动物。

(2) 耗气破气法：有学者以耗气破气为造模因素，根据脾虚忌下，降泄药物易耗气破气，采用厚朴三物汤等耗气破气之方剂。亦有学者认为此法仍属苦寒泻下法的范畴。

(3) 饮食失节法：饮食失节，则脾胃乃伤。采用禁食与暴饮暴食交替实施，或给予限量饮食，或高脂、高乳糖饲料饲养，或灌胃厚腻猪油等。

(4) 饮食偏嗜法：灌胃酸味的食醋，或苦味的黄连、杏仁水煎剂，或酒醋结合，或给予辛温燥热的混合饲料等。

(5) 劳倦过度法：根据“劳则气耗”的病机，采用振荡器长时间振荡，或跑步机跑步，或强制游泳法，或小平台站立法。

化学药物与物理因素造模

有学者根据临床上运用化学药物或放射疗法治疗的副作用类似脾虚证症状来造模，这类方法具有操作简单、成模迅速、症状明显的优点，但因机制单一，不符合脾虚证复杂且缓慢的病理过程，在研究中应用较少。造模方法如下：

(1) 利血平注射法：脾虚患者常见交感神经抑制，副交感神经偏亢的症状，利血平消耗儿茶酚胺的作用使副交感神经兴奋，与脾虚症状相似。

(2) 秋水仙碱法：长期使用秋水仙碱导致消化吸收不良、肌无力等副作用，与中医脾气虚证密切相关。

(3) X射线照射法：放射治疗所致副作用临床表现以中医脾虚、气虚为主。基于此现象通过X射线照射大鼠腹部塑造慢性脾气虚模型。

复合因素法造模

即采用上述两种及以上方法来造模，使动物模型更加符合临床的复杂病情，是目前主流的造模方法。如饮食失节法+劳倦过度法，可使用隔日禁食+小平台站立；苦寒泻下法+饮食偏嗜法，可使用灌胃大黄煎剂+乙醇灌胃；饮食失节法+劳倦过度法+苦寒泻下法，可使用猪油甘蓝饲喂+强制游泳+灌胃番泻叶煎剂。

消化系统疾病的脾虚证候的病证结合模型研究

如今中医病证同重，中医脾胃理论与现代消化系统疾病关系密切，脾虚证模型日臻成熟，学界将重心转移到消化系统疾病脾虚证病证结合模型研究，常见疾病有功能性腹泻、功能性消化不良、便秘、胃溃疡、溃疡性结肠炎等，其中功能性腹泻和功能性消化不良发病中脾虚证占据绝大部分。病证结合模型造模思路较为统一，即选取公认的疾病造模方式结合上述基于病因病机的脾虚证造模方法。消化系统疾病症状与脾虚证症状多有重叠，还应关注模型动物非重叠症状以明确病和证均得到复刻。

功能性腹泻脾虚证模型

用高乳糖饲料结合水平台站立法建立功能性腹泻脾虚证模型，对模型不同时间节点的各项指标进行观测，综合评价模型，并灌胃四君子汤反证其模型。用同样方法建立功能性腹泻脾虚证大鼠模型，发现肠道黏膜微绒毛形态微观结构的改变，结肠黏膜组织中的水通道蛋白4(AQP4）、水通道蛋白8(AQP8）的表达水平降低，水分吸收减少可能是导致腹泻的原因。

功能性消化不良脾虚证模型

有研究采用碘乙酰胺灌胃叠加水平台站立法建立功能性消化不良脾虚证模型大鼠，发现大鼠抓力、胃排空率明显降低，促肾上腺皮质激素释放因子（Corticotropin Releasing Factor，CRF）和尿皮质素2（Urocortin 2，UCN2）表达明显降低，胃组织线粒体呼吸链复合物IV亚单位（Mitochondrial Respiratory Chain ComplexⅣA，COX VA）蛋白和m RNA表达降低，能量代谢受损；胃体组织Ca2+/钙调蛋白（Calmodulin，Ca M）、肌球蛋白轻链激酶（Myosin Light Chain Kinase，MLCK）、肌球蛋白轻链（Myosin Light Chain，MLC）蛋白及基因的表达降低，胃动力，胃体、胃窦平滑肌肌条收缩力和收缩周期频率紊乱；胃组织蛋白激酶样内质网激酶（Protein Kinase R-like Endoplasmic Reticulum Kinase，PERK）蛋白表达增加，内质网应激（Endoplasmic Reticulum Stress，ERS）加强；小肠组织葡萄糖转运体蛋白1（Glucose Transporter 1，GLUT1）蛋白与m RNA表达降低，葡萄糖吸收能力降低。

便秘脾虚证模型

脾虚型便秘多用KM小鼠，采用“番泻叶灌胃+控制饮食、饥饱失常法”造模。先用纯番泻叶溶液灌胃，制造脾虚证模型，待成功后，再控制饮食，给予模型动物间断性喂食的方法制备便秘模型。

胃溃疡脾虚证模型

胃溃疡脾虚证模型多用大鼠，采取大黄苦寒泻下法建立脾虚动物模型脾虚造模成功后，灌胃无水乙醇刺激胃黏膜造成胃溃疡。

溃疡性结肠炎脾虚证模型

溃疡性结肠炎脾虚证模型在造模方法上主要选用病因模拟法先复制脾虚证，如番泻叶浸泡液灌胃，后选用化学制剂或免疫制剂诱导疾病模型的造模方法，所选化学试剂以5%葡聚糖硫酸钠（DSS）自由饮用或2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）加50%乙醇混合试剂灌肠为主。

在病证模型研究中，疾病的造模方法多有业界标准和共识，而以“脾虚”和“标准”/“共识”进行检索，结果皆为临床诊疗共识，缺乏脾虚证模型行业标准和共识。譬如，虽有广为使用的造模方法，但造模时间则是因人而异，由于动物对造模因素有耐受表现，同一指标在不同时间节点水平不一，进而导致同行间数据偏差，难以保证模型的重复性，无法形成统一结论。脾虚证型造模方法繁多，涉及复杂生理系统，评价指标多样，模型中医证型指标皆为类比脾虚患者而来，亟需学界专家达成涉及造模方法、评价指标的共识，以标准规范发展。评价指标多从中医“脾”的功能和特性类比相应生化指标，涉及脾主运化、脾主统血、脾在体合肉主四肢、脾在志为思、脾在液为涎等方面。但在具体研究中评价指标缺乏系统性和整体性，各研究常以单一或少数指标作为依据，易造成评价的偏差。由此造成模型的不标准，或者说没有标准化，但见一“证”便是，也因此造模方法层出不穷，难以出现标准化的模型，两者互相掣肘。当然也有学者在系统性和整体性进行了有益探索，如陈婉珍等[53]基于代谢组学技术的脾虚证研究。中医经典藏象理论中，脾的生理机能、生理特性与形、窍、志、液、时通过精气阴阳、水谷精微统一起来。而现代科学背景下的脾虚理论研究庞杂而细分，需要纲举目张，统一理论，各类组学技术符合中医整体观念，人工智能的突破或许可以帮助梳理理论网络，应该积极拥抱前沿技术，服务于学术研究。

综上所述，脾虚证模型亟需达成涉及造模方法、评价指标的学界共识，系统性和整体性地用指标评价模型，并运用前沿技术阐释大统一的现代脾虚理论。

Source: 世界科学技术-中医药现代化. 2024, 26 (03)，脾虚证动物模型研究述评