一.实验方法:
方法一:LPS加烟熏造模动物模型
香烟烟熏,每天2次,每次10根烟,每周熏6天。第1天、第15天、第29天及第43天气管内滴注脂多糖(用量1 mg/kg)时不予烟熏,造模8周。
成功方法二:烟熏
香烟烟熏,每天2次,每次10根烟,每周熏6天。连续诱导6个月。
二.实验结果
2.1HE染色显微镜观察可见气道上皮细胞纤毛脱落倒伏,部分出现鳞状化生;终末小气道管腔内较多炎性分泌物阻塞气道;气道管壁明显增厚,胶原蛋白沉积增多;肺大疱和肺气肿形成;肺泡腔内可见吞噬烟尘颗粒的巨噬细胞集落。
2.2COPD组:各级支气管黏膜上皮细胞变性、坏死、增生,纤毛倒伏、部分脱落,黏液分泌增加,杯状细胞增多;肺实质呼吸性支气管及肺泡破坏、断裂,部分融合形成肺大泡;肺间质明显增生,炎症细胞广泛浸润。
病理评分标准:在每个视野正中心划十字交叉线,计算与交叉线相交的肺泡间隔数(Ns)和每个视野内肺泡数(Na),同时测量十字线总长(L)和每个视野面积(S)。
根据以下公式计算肺组织平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN)∶MLI=L/Ns(其数值反映肺泡平均直径)、MAN=Na/S(其数值反映肺泡密度)。肺泡破坏指数(Destructiveindex, DI)的测定参照陈燕等[6]的方法进行:每只小鼠取3个HE 染色切片,每张切片低倍镜( 切片,每张切片下至少观察20个非重复视野,分别以正常(N)或破坏(D)记录肺泡结构的破坏情况,要求每一例各切片的N、D值总和≥总和泡结"改为3000,以公式计算DI=D/(D+N)×100。