一.实验方法:
方法一:6-OHDA诱导PD模型
SD 大鼠适应一周后,腹腔麻醉;将麻醉后大鼠固定于大鼠脑立体定向仪上;剪开大鼠头顶部皮肤、筋膜,充分暴露前囟、后囟点;调整门齿钩平面使前囟与后囟在同一水平面上;以前囟(Bregma)点为原点,确定左、右两侧纹状体注射位点:
①左:前囟前1.0mm,矢状缝左侧 3.5mm,颅骨骨膜下 4.5mm;
②右:前囟前 1.0mm,矢状缝右侧 3.5mm,颅骨骨膜下 4.5mm;用颅骨钻沿注射坐标位点钻孔, 以保证微量注射器进针时不碰到孔壁;微量注射器吸取 6-OHDA(注意避光);首先按坐标位点注射 6-OHDA,注射剂量为4μl(浓度 2μg/μl),注射速度0.5ul/min,注射结束后留针 5min,然后缓慢退针;以前囟点为原点,重新定位第二个注射位点注射;最后一次退针后止血、消毒、针线缝合切口,将大鼠放入笼中,注意保温。对照组造模具体步骤同上,把 6-OHDA换成生理盐水。
方法二:MPTP诱导PD模型
MPTP大鼠腹腔注射20mg/kg/d,给药7天。
二.实验结果
2.1旷场检测
2.2黑质TH染色