CUIM和UCSF的研究者们和他们的小鼠朋友们发现了这群“好怕怕”的细胞，研究成果“Anxiety Cells in a Hippocampal-Hypothalamic Circuit”发表在最新的《Neuron》上哦！

• 高架十字迷宫实验（Elevated plus maze, EPM）

• 旷场实验（Open field test, OFT）

这两种方法的原理都是基于小鼠的趋避性——也就是小鼠畏惧开阔、未知、可能具有危险的场所，而天性喜欢“贴墙”活动。

南模生物可提供单项或成套的小鼠行为学分析服务

高架十字迷宫（EPM）

由开放臂（open arm）和封闭臂（close arm）各两条组成，呈十字形交叉，交叉部分为中央区域。整个十字形迷宫距地面有一定的高度。

小鼠面对开放臂产生好奇心而想要探索，同时又有着趋暗避明的天性，两者之间发生探究与回避的冲突行为，产生焦虑心理。可以通过比较小鼠在开放臂和封闭臂内的滞留时间和路程来评价小鼠的焦虑行为。一般认为，小鼠在开放臂中滞留的时间和路程越多，小鼠的焦虑水平越低。

旷场实验（OFT）

装置一般有一个正方形的箱子，顶部有摄像机。

这个正方形的场地可以划分为中央区域（center）和周边区域（periphery）。

小鼠如果在中央区域的活动越多，说明小鼠的焦虑水平相对就越低。当然，评价焦虑水平的行为学实验还有很多，比如：穿梭箱试验（Shuttlebox test），明暗探索实验（Light/Dark Exploration Test），社交活动试验 (Social interaction test) 等等。以后我们再一一介绍。

科学研究表明

1.利用神经元钙离子成像技术（calcium imaging），将小型显微镜插入实验小鼠的大脑中，记录大脑海马区域中细胞的活动情况。

在EPM中，当小鼠探索开放臂时，海马腹侧CA1（Ventral CA1, vCA1）区域的神经元细胞活动明显增加。当小鼠在开放臂中向高架下方探头时，vCA1神经元活性进一步升高。此外，vCA1激活水平与小鼠对开放臂的躲避程度呈正相关。小鼠越焦虑，vCA1神经元细胞越活跃。

2.利用光遗传学技术使vCA1神经元细胞沉默，小鼠就会放弃相对安全的封闭臂，反而徘徊在EPM开放臂上，远离防护墙。

3.在抑制性GABA能神经元特异性Cre小鼠（vGAT-Cre）中使用钙离子成像技术发现，vCA1抑制性中间神经元并未参与到与焦虑相关的行为（对开放臂的探索）中。

4.基底杏仁核（BA）和外侧下丘脑（LHA）是两个与焦虑相关行为、习得性恐惧、压力抑郁密切相关的脑区。

利用光遗传学技术发现，vCA1神经元既投射到BA，也投射到LHA。

用两种不同的逆行示踪染料染色发现，投射到BA的vCA1神经元与投射到LHA的vCA1神经元并不重叠，是两群不同的细胞。

5.这两种不同的vCA1投射回路对小鼠的行为有不同的作用：

激活vCA1-BA投射后，小鼠场景恐惧条件反射的建立受到干扰；而激活vCA1-LHA投射不影响场景恐惧的编码与读取。

激活vCA1-LHA投射反而使小鼠在旷场实验中中央区域的探索显著减少，增加了小鼠的焦虑水平；而激活vCA1-BA投射不影响小鼠的焦虑行为。

6.利用可逆行感染投射神经元的2型犬腺病毒CAV2-Cre，分别注射在BA或LHA区域，结合钙离子成像技术发现，EPM实验中，vCA1-LHA神经元在开放臂与封闭臂之间的活性变化差异更明显，而且被开放臂激活的焦虑细胞中vCA1-LHA神经元也占据主力。