目的 明确急性臭氧暴露后大鼠肺泡灌洗液来源的外泌体中微小 RNA(microRNA,miRNA)表达谱 的变化,并分析其与肺损伤的潜在关系。

方法 将成年雄性 Wistar 大鼠放入气体染毒舱内分别暴露于 0、0. 5 和 2 ppm 臭氧 6 h。 实验结束后 24 h 麻醉大鼠,收集肺泡灌洗液并提取外泌体。 采用 miRNA-seq 技术检测外泌体中 差异表达的 miRNA,使用 miRDB 数据库对组间差异表达 Top 10 miRNA 进行靶基因预测,并对靶基因进行 Gene Ontology 功能富集和 KEGG Pathway 分析。 利用 qRT-PCR 方法对表达丰度较高且组内均一性较好的差异表达 miRNA 进行验证。

结果 与 0 ppm 组相比,0. 5 ppm 组大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 有 8 个上调、55 个下调,而 2 ppm 组中有 32 个上调、61 个下调。 与 0. 5 ppm 组相比,2 ppm 组大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 有 90 个上调、 74 个下调。 差异表达 Top 10 miRNA 的靶基因主要参与调控 DNA 结合、杂环化合物结合和影响转录等方面,并与 癌症、MAPK、PIK3-AKT、TNF、ErbB、线粒体自噬和 FoxO 等信号通路密切相关。 qRT-PCR 结果表明测序结果基本可 靠。

结论 急性臭氧暴露可导致大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 表达谱发生变化,差异 miRNA 可能参与了臭氧 暴露所致的肺组织炎症、肺损伤等病理进程。

阅读原文：急性臭氧暴露对大鼠肺泡灌洗液中外泌体miRNA表达谱的影响.pdf