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动物实验的无菌操作

无菌操作

无菌技术操作是在执行医疗、护理技术操作过程中,使已灭菌的物品保持无菌状态不再受污染,防止任何微生物进入机体的一种方法。无菌操作是控制感染的基本途径,做好无菌化控制,能够尽量将创口污染和术后感染发生的概率降到最低。在动物实验的时候需不需要注意无菌操作呢?答案是肯定的,大多数实验动物在术后需要饲养相当长的一段时间,为准确观察器械或手术操作对于动物的影响,需尽可能排除其它因素对动物造成影响,无菌操作是排除环境因素造成动物术后感染的关键一步。因此,在进行手术、穿刺、注射、换药、插导管等各项操作时,必须提前做好对应的准备,确保各个流程都能够达到无菌化操作要求,防止细菌进入机体,预防细菌感染。

手术室中的人员、手术器械、相关设备和实验动物本身,在消毒处理不彻底的情形下,这些环节都有可能出现感染现象。下面我们从动物实验方面简单介绍下无菌操作。


术前准备


01、环境清洁

实验室内空气污染是动物外科手术感染的主要原因,可采用紫外线照射法和甲醛熏蒸法对实验室进行消毒。进行无菌技术操作前半小时,停止卫生处理,减少人员走动,以降低室内空气中的尘埃。

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02、个人准备

无菌操作前,衣帽穿戴整洁,口罩遮住口鼻,修剪指甲、洗手。进行外科洗手法及外科手消毒,两洗两消;在穿无菌手术衣及戴无菌手套时,手不应接触手术衣和手套的外面。

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03、用物准备

无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内,无菌包外注明物品名称,有效期一周为宜,并按有效期先后顺序排放。注意手术包装袋的外包装,如果出现破损、潮湿现象,则应当视为被污染,需要更换处理,必要时使用一次性无菌用品。无菌物品和非无菌物品应分别放置。实验人员手术前应筹划好手术所需一切材料(包括手术中用到的仪器、器械、敷料等),准备好并带入手术实验室(在术中再进出手术实验室将增加动物感染风险)。

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手术阶段


01、动物无菌手术所用的耗材均应事先消毒灭菌并烤干,无菌用品均放置在清洁区域,避免手术者以外的人接触。
02、用完的物品要有指定位置存放(即手术中用过与未用的物品要分开放置);如要反复使用(如手术器械),应做好清洁消毒工作,及时用75%乙醇消毒。可提前准备两个肾形盘(一个盛消毒酒精,另一个盛生理盐水),最好是不锈钢材质的。在无菌区内,必须要保持所有物品的可视化,因为灭菌物品在可视情况下可以降低被非无菌物品污染的可能性。也就是仅能将台面高度以上的空间视为无菌状态,而在视线以外的创巾和绷带等,则应视为已被污染。
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03、动物的手术、注射等部位要剃毛并用皮肤消毒剂消毒彻底。第一遍消毒液由手术区中心开始,向周围皮肤无遗漏地涂布药液。第一遍消毒液待干后,换敷料钳以同样方式涂布手术区皮肤1-2遍。污染手术,涂布消毒液由手术区周围向中心。手不可碰到手术区。消毒皮肤完毕,铺手术巾,然后双手再浸泡于洗手消毒液中2-3min。手术部位皮肤消毒后,由执行消毒的医师和器械护士,按顺序于手术区周围先铺无菌巾,再铺盖无菌单。巾、单之下界要遮至手术者的腰平面以下至少30cm。铺单后,允许将单子自手术区向周围稍移动,不允许自周围向手术区移动,以免污染手术区。
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04

对于手术操作人员来说,在穿好手术服之后,仅有肩部至腰部位置,手套指尖至肘关节向上5cm范围内可以视为无菌区,这就要求在进行手术操作时,如果采用坐姿操作,则保持坐姿至手术结束,双手要全程保持在腰部水平以上。

05

手术时间尽量缩短,减少创口与空气接触时间,降低感染。实验动物的皮肤和工作人员手臂经过消毒以后只能达到相对灭菌,残存在毛孔内的细菌对开放的切口有一定的威胁,凡与皮肤接触的刀片和器械不应再用。手术进行中,如手套被撕破或被缝针、锐利器械刺破,应立即更换。针和器械也不可再用。

06

进行胃肠道、呼吸道、宫颈等污染手术时,在切开空腔前应用纱垫保护周围组织,并随时吸除外流的内容物。被污染的器械和其他物品应放在污染盘内,实行隔离。污染的缝针和针持应在等渗盐水中涮洗。全部污染步骤完成后,手术人员应用无菌水冲洗或更换手套,以尽量减少细菌的污染。


术后护理


动物营养缺陷和外界环境的变化等都可使细菌的耐药性增强,为提高动物抵抗力促进创伤修复,对动物应做好营养状况的估计,保证得到充足的营养和热量,有利于术后恢复和抵抗细菌的侵袭。动物实验显示,严重营养不良(体重丧失超过1/3时)对伤口愈合有影响。

同时,要做好术后引流、监测。伤口的感染多发生在术后15天内,症状主要为发热、伤口局部红、肿、热、痛,有脓性分泌物。

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本质上来说,并不存在真正意义上的无菌操作,在所有的创口部位,都会存在污染现象。实验人员必须树立牢固的无菌观念,严格遵循无菌操作的原则,养成良好的习惯。动物实验无菌操作不仅局限于手术过程,还是贯穿在整个实验工作中,包括实验前期的准备、实验中的操作、还有实验后动物的护理。所以我们实验人员要仔细认真把控好每个环节,这样才能把实验的风险降到最低,把每只实验动物的价值体现出来。

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