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做动物实验,我们要分几组?每组要几只动物?怎么分配动物?一文全解答!

许多刚开始接触动物实验的小伙伴可能都会有点迷茫,不知道怎么给实验动物分组,要分几组、每组要几只动物,怎么分配。别担心,今天的文章就来给你一一解答。

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我们要分几组?

动物实验时,我们会设置不同的实验小组。怎么分组、每组多少动物,这些都直接影响到实验结果的可信度和统计分析。所以,设置实验动物分组是非常重要的一步。

一般来说,我们可以分为自身对照组、平行对照组。平行对照组又可以细分为正对照组和负对照组(也就是空白对照组)。

  • 自身对照组:就是比较动物实验前后的数据。

  • 正对照组:和自身对照组做相同的操作,但不包括我们要研究的那个因子(比如治疗的药物、给药的方法或部位)。

  • 负对照组(空白对照):什么操作都不做。

另外,还有一种常用的3组对照分组法:

设置空白对照(负对照)组、模型对照(正对照)组、阳性对照组。

模型对照组:对疾病模型动物做阴性处理(比如用溶剂或赋形剂)。

阳性对照组:对疾病模型动物用有效的药物治疗(或其他已知的有效处理)。

设计3个或以上的计量梯度。最终得到的分组如下:

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分组的时候,可以根据实验的实际情况灵活调整。比如,如果实验中不需要疾病模型,那就可以去掉模型对照组;如果实验里没有阳性药,那就可以不设置阳性对照组。

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每组要几只动物?

样本量并不是越大越好。样本量大不仅实验操作难度会增大,还会浪费实验经费,无法严格把控实验质量,也违反了实验动物的“3R原则”(替代、减少、优化)。但是,样本量过少也可能导致最终数据没有差异,出现阴性结论,这样的实验结果就不具备统计学意义和说服性。

确定每组动物数量的方法有几种:

第一种:最简单、适用范围最广的方法

在满足实验动物3R原则和统计学的前提下,每组至少6个样本量。其中,实验小鼠每组至少10只,大鼠每组6只,体型更大的动物每组样本量可以适当减少1~2只。

第二种:自由度(E)估算

自由度是方差分析中的重要指标。当E<10时,表示样本量过小;当10≤E≤20时,表示样本量是正常值;当E>20时,表示样本量过大。

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第三种:严格计算样本量

如果对实验中的样本量要求非常严格,可以使用更复杂的公式来计算。

当基于两组均数计算样本量时,计算公式如下:

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多组均数计算样本量时,计算公式如下:

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上面三种方法中,后两种方法更偏向于临床研究使用,因为需要考虑人群中的个体差异。但我们使用的实验动物品系纯化度高、个体差异小,所以大多数的动物实验不必考虑个体差异因素的影响,可以直接参考第一个方法。同时,也可以多查阅文献和咨询有经验的小伙伴。

特别注意:如果实验中有损耗(比如动物死亡等原因),最好在正常的样本量基础上加上可供损耗数量的样本量。

怎么分配实验动物?

为了减少个体间的差异,保证最终实验数据的真实性,建议采用随机分配的方法。分配方法要根据不同的实验目的与对象来确定。常见的方法有:

1. 完全随机设计:将动物逐一编号,然后使用随机数表将动物分组。这个方法适用于个体之间差异较小的动物。

2. 随机区组设计:将所有的实验动物分为几个区组(建议区组数量>3),区组中的样本数量控制在区组数的2倍及以上。之后将每区组的动物依照完全随机设计分配至各个实验分组中。这个方法适用于个体间差异较大的动物。

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